（四）Genia Technologies（罗氏）[1]

1、公司介绍

2009年成立，2014年以3.5亿美元被罗氏收购，其中包括1.25亿美元的现金和高达2.25亿美元的里程碑付款[2]，公司目前仍未推出商业化的测序仪产品。

2、测序原理

Genia测序仪的测序载片以“跨膜纳米孔阵列”和“专用集成电路”为基础进行构建，且每个纳米孔上连结有一个DNA聚合酶，理论上该聚合酶将捕获一条待测核酸分子（线型或环形均可）进行聚合反应，所以在碱基信号“载体”产生的方式上，均以“单分子边合成边测序”为核心技术路线（参考其核心专利之一CN 104955958 A）。

在其技术上我们可以看到PacBio和Oxford Nanopore的影子，与PacBio的相似点在于其检测标记均直接接到了聚磷酸基的末端，区别在于Genia的“检测标记”不一定是“荧光基团”，而是任何可在纳米孔中被检测到的化学基团或分子，例如乙二醇、氨基酸、化学发光化合物甚至核苷酸等；与Oxford Nanopore相似点在于两者均为跨膜的纳米孔进行构建，区别在于Genia将聚合酶连结在纳米孔上。

（五）Stratos genomics[3]

1、公司介绍

Stratos genomics公司成立于2007年，总部位于美国的西雅图。早在2014年罗氏就曾参于Stratos的B轮融资，2020年被罗氏收购。

2、SBX™测序技术

（1）原理

Stratos开发了“边扩大边测序”（“Sequencing By Expansion™”，SBX™ ）技术，该技术的核心是一种叫X-NTPs的新核苷酸，和普通dNTPs相比，X-NTPs在碱基环和五碳糖连接的磷酸基团之间，加入了一个loop，该loop可以分别标记ATCG四种不同的核苷酸，同时在五碳糖和相邻的磷酸基团之间有一个可切割的linker，当切断linker后展开的loop长度是原来DNA长度的50倍（如图），将通过纳米孔时产生的信号进行放大，每个碱基的信号也更容易检测，同时相邻碱基的信号更容易区分（如图）。

图. 加入loop的核苷酸、切断linker后展开的loop

图. 碱基信号的检测[4]

（2）优势与不足

优势：

• SBX利用简单的生化反应将DNA分子的序列编码成一种高度可测量的替代聚合物，使每个DNA碱基的信号被放大了50倍，解决了纳米孔测序中信号微弱检测难度大的问题，可以准确区分ATCG四种碱基；

• 消除了其他测序技术所需的大量样品制备程序，整个过程很快，不到一小时，使得快速诊断和治疗成为可能。

不足：

• SBX的reads读长在222bp，相比于常规三代的长读长，Stratos还是很短，和二代平台在一个水平。

   

（六）其他公司及技术

除上述列举的公司和技术外，我们汇总了国外其他的单分子测序公司及其技术路线。

注：部分公司目前还处于早期阶段（如国际专利申请），或属于机密内容并未过多说明。

参考文献：

[1] 资料来源：知乎 https://zhuanlan.zhihu.com/p/351728337

[2] 资料来源：生物通http://www.ebiotrade.com/newsf/2014-6/2014627165025926.htm

[3] 资料来源 https://www.stratosgenomics.com/

[4] 图片来源：网络整理、罗氏官网

[5] https://nabsys.com

[6] https://geneseque.com/our-technology/

[7] https://quantapore.com/technology/

[8] 资料来源https://36kr.com/p/1723102363649

[9] https://www.personalgx.com/

[10] https://missionbio.com/ 

[11] 资料来源https://www.cn-healthcare.com/articlewm/20200814/content-1138079.html

[12] 资料来源https://mp.ofweek.com/medical/a245683723256

封面图来源：图片来自网络，侵删

作者声明：感谢本文参考资料作者，文中观点仅供参考，不恰当之处还望包涵指正，资料内容侵删。

作者：李芳 武瑾嵘

审核：李芳